大多數細胞在
msc無血清培養基中單獨培養時都不能增殖,它們需要補充額外的生長因子和細胞因子,如激素、轉運蛋白、微量元素或ECM因子。激素如胰島素、生長激素等胰島素作為一種多肽激素,對哺乳動物細胞具有多效合成作用,促進葡萄糖和氨基酸攝取、脂肪生成、單價陽離子和磷酸轉運、蛋白質和核酸合成。轉運蛋白,如轉鐵蛋白,轉鐵蛋白作為鐵的載體,也有助于降低氧自由基和過氧化氫的毒性水平。ECM因子是某些貼壁生長細胞所必需的組分,如纖連蛋白、膠原蛋白、層粘連蛋白等。
下面為大家分享一下msc無血清培養基的使用注意事項:
1、細胞培養用水一般為三蒸水(經石英蒸餾器蒸餾)或超純水,生產上一般為注射用水。
2、建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質或因受潮而結團。
3、溶解干粉培養基時先加入終體積90%-95%的培養用水,添加劑加完后再補足。
4、如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
5、待msc無血清培養基溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產生沉淀。
6、所有成分溶解后,培養基應立即過濾或高壓除菌,以免產生沉淀或有微生物污染。
7、在過濾除菌時,一般情況下應調pH比所需值低0.1~0.2個單位,因過濾除菌后,pH值會升高約0.2。
8、在細胞培養過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些。
9、建議用1NHCl或1NNaOH來調節培養基的pH,因為用碳酸氫鈉來調對培養液的滲透壓影響比較大。